球松素靶向肠上皮细胞PI3K/AKT/CCL2轴抑制巨噬细胞肠道浸润缓解葡聚糖硫酸钠诱导的小鼠结肠炎
张可妮1
乔通1
尹林1
黄菊2
耿志军2
左芦根3
胡建国4
李静4
1.蚌埠医科大学第一附属医院检验科,安徽 蚌埠 2330002.蚌埠医科大学第一附属医院中心实验室,安徽 蚌埠 233000;蚌埠医科大学第一附属医院炎症相关性疾病基础与转化研究安徽省重点实验室,安徽 蚌埠 2330003.蚌埠医科大学第一附属医院炎症相关性疾病基础与转化研究安徽省重点实验室,安徽 蚌埠 2330004.蚌埠医科大学第一附属医院检验科,安徽 蚌埠 233000;蚌埠医科大学第一附属医院炎症相关性疾病基础与转化研究安徽省重点实验室,安徽 蚌埠 233000
摘要：目的 探讨天然黄酮类化合物球松素(PSB)调控巨噬细胞肠道浸润缓解葡聚糖硫酸钠(DSS)诱导的小鼠结肠炎的作用机制.方法 将30只C57BL/6雄性小鼠随机分为对照组(WT)、DSS模型组(DSS)及PSB干预组(30、60、120 mg/kg),6只/组.通过体质量变化、疾病活动指数(DAI)、结肠长度及组织病理学评分评估结肠炎表型;免疫荧光检测紧密连接蛋白ZO-1/Claudin-1表达;流式细胞术定量分析结肠巨噬细胞(CD45+F4/80+CD11b+)浸润及极化表型(M1:iNOS+;M2:CD206+);ELISA及RT-qPCR检测炎症因子(TNF-α、IL-6)及趋化因子(CCL2、CXCL10、CX3CL1)表达;Western blotting分析PI3K/AKT磷酸化水平;体外浓度梯度实验明确PSB抑制CCL2的最佳剂量;Transwell实验验证CCL2介导的巨噬细胞迁移;结合网络药理学预测关键靶点通路.结果 预实验确定PSB 60 mg/kg为最佳治疗剂量,缓解DSS诱导的结肠炎症状:与DSS组相比,PSB组体质量下降减少(P<0.05),DAI评分降低(P<0.05),结肠长度恢复(P<0.05).PSB上调紧密连接蛋白ZO-1/Claudin-1表达(P<0.05),抑制结肠固有层巨噬细胞浸润(F4/80阳性细胞显著减少,P<0.05)并调控其极化(抑制M1促炎亚群,激活M2修复亚群,P<0.05).分子机制分析结果显示,PSB抑制肠上皮细胞PI3K/AKT磷酸化水平(P<0.05),抑制趋化因子CCL2表达(P<0.05),并阻断CCL2介导的RAW264.7细胞迁移,该效应可被外源性CCL2逆转.网络药理学富集分析及体外补救实现证明PI3K/AKT及CCL2趋化因子信号通路为核心调控靶点.结论 球松素通过靶向抑制肠上皮细胞PI3K/AKT通路活化,减少CCL2分泌,进而阻断巨噬细胞趋化迁移并调控其极化表型,缓解DSS诱导的小鼠结肠炎,为炎症性肠病的天然化合物干预提供新策略.
关键词：球松素葡聚糖硫酸钠结肠炎巨噬细胞浸润PI3K/AKT信号通路CCL2
资助基金：安徽省临床医学研究转化项目(202427b10020088)炎症相关性疾病基础与转化研究安徽省重点实验室开放课题(YZ2024D10)安徽省高校优秀青年基金项目(2022AH030138)安徽省教育厅优秀青年教师培育项目(YQYB2023019)
论文发表日期：2025-10-20
在线出版日期：2025-11-03（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：11( 2199-2209 )
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