EVA1A过表达通过调节脂质代谢和促进脂滴自噬改善非酒精性脂肪肝
徐嘉艺
杨迪
臧开来
褚孟恩
赵庆瑶
李晴
鲁森
陈修丽
李宁
青岛大学青岛医学院基础医学院生物化学与分子生物学系,山东 青岛 266071
摘要：目的 研究跨膜蛋白EVA1A在肝脏脂质代谢及非酒精性脂肪肝病发展过程中的作用及机制.方法 将8周龄雄性ob/ob小鼠随机分为对照组和实验组,8只/组,实验周期为7周.对照组通过尾静脉注射AAV空载体(AAV-null组),实验组注射重组载体AAV-Eva1a(AAV-Eva1a组).在人HepG2细胞中使用慢病毒载体LV-EVA1A过表达EVA1A后,使用油酸诱导构建NAFLD细胞模型,设为实验组LV-EVA1A组,对照组为LV-Vector组.采用RT-qPCR、Western blotting、免疫荧光实验测定EVA1A、脂质代谢相关基因以及自噬相关基因的表达情况;采用HE染色、油红O染色以及血脂四项试剂盒检测肝脏、血液和细胞中的脂质积累情况;采用丙氨酸氨基转移酶(ALT)试剂盒、门冬氨酸氨基转移酶(AST)试剂盒、白细胞介素-6(IL-6)试剂盒、白细胞介素-1β(IL-1β)试剂盒以及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)试剂盒测定炎症指标;采用透射电镜观察肝脏脂滴自噬情况.结果 与对照组相比,实验组小鼠肝脏和实验组细胞中EVA1A 的mRNA水平和蛋白水平升高(P<0.05),小鼠肝重和肝脏系数降低(P<0.01),脂质沉积减少,细胞内甘油三酯(TG)含量降低(P<0.01);小鼠血清中的总胆固醇、低密度脂蛋白-胆固醇、高密度脂蛋白-胆固醇和肝脏中的TG水平均降低(P<0.05),血清ALT、AST的水平和炎症相关细胞因子IL-6、TNF-α的水平均降低(P<0.05);实验组小鼠肝脏和实验组细胞中的乙酰辅酶A羧化酶、脂肪酸转运酶、二酰基甘油酰基转移酶的表达均降低(P<0.05),而甘油三酯脂肪酶的表达升高(P<0.05);实验组小鼠肝脏中的脂滴自噬增强,实验组细胞中的自噬体数量增多,实验组小鼠肝脏以及细胞中p62的表达均降低(P<0.05),LC3-Ⅱ和ATG5的表达均升高(P<0.05).结论 EVA1A能够改善ob/ob小鼠脂肪肝和炎症,通过抑制脂质摄取和合成相关基因的表达,促进脂质分解相关基因的表达和促进脂滴自噬来清除肝脏积累的脂质.
关键词：脂肪肝EVA1A炎症脂质代谢脂滴自噬
论文发表日期：2026-01-20
在线出版日期：2026-01-22（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：9( 150-158 )
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