叶酸预处理髌下脂肪垫来源间充质干细胞来源的外泌体调控巨噬细胞极化
王喆1
孔柯瑜2
金明昊2
伍信儒2
范文轩2
翟赞京2
胡子豪1
牛琳3
齐岩松3
徐永胜1
1.内蒙古医科大学内蒙古临床医学院,内蒙古 呼和浩特 010017;内蒙古自治区人民医院骨科中心(运动医学中心),内蒙古 呼和浩特 0100172.上海交通大学医学院附属第九人民医院//上海市骨科内植物重点实验室,上海 2012003.内蒙古自治区人民医院骨科中心(运动医学中心),内蒙古 呼和浩特 010017
摘要：目的 探讨叶酸(FA)修饰的髌下脂肪垫间充质干细胞(IPFP-MSCs)来源外泌体(Exos)通过调控巨噬细胞M1/M2极化改善膝骨关节炎(KOA)炎症微环境的作用.方法 提取培养IPFP-MSCs,加入FA进行处理,利用超速离心法分离Exos.将RAW264.7细胞分为对照组(未处理)、脂多糖(LPS)组(加入LPS)、LPS+Exos组(加入LPS及Exos)和LPS+FA-Exos组(加入LPS及FA修饰的Exos),分别处理12 h.采用透射电镜、纳米颗粒跟踪分析和Western blot鉴定外泌体,使用共聚焦显微镜观察其摄取情况.通过q RT-PCR、ELISA、流式细胞术和免疫荧光检测各组促炎因子(IL-1β、IL-6、TNF-α、iNOS)与抗炎因子(ARG1、MRC1、CD206)表达水平.结果 透射电镜显示IPFP-Exos呈典型杯状,CD9与CD81蛋白表达阳性;共聚焦结果证实其可被巨噬细胞摄取.qRT-PCR与ELISA结果表明,LPS+FA-Exos组促炎因子IL-1β、IL-6、TNF-α、NOS2表达较LPS组显著下降(P<0.0001),抗炎因子ARG1、MRC1表达升高(P<0.0001).流式检测显示,FA-Exos组CD86阳性比例下降,CD206及其比值升高(P<0.0001).免疫荧光显示FA-Exos组iNOS表达减少(P=0.0478),CD206表达增强(P=0.0003).结论 FA-Exos可有效调控巨噬细胞由M1型向M2型极化,免疫调节作用优于未修饰Exos,这种双重调控机制可有效缓解关节腔促炎微环境,为KOA的靶向治疗提供了新型外泌体修饰策略.
关键词：叶酸巨噬细胞外泌体间充质干细胞骨关节炎
资助基金：内蒙古自治区自然科学基金项目(2024ZD32)内蒙古自治区自然科学基金项目(2024LHMS08015)内蒙古自治区首府地区公立医院高水平临床专科建设科技项目(2024SGGZ015)
论文发表日期：2026-01-20
在线出版日期：2026-01-22（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：9( 166-174 )
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