清肾颗粒通过调控糖酵解重编程及组蛋白H3K18乳酸化减轻小鼠肾纤维化
陈义珍
王伟丽
程梦
张威
高怡琳
洪馨
张磊
戴荣
王亿平
安徽中医药大学第一附属医院肾内科,安徽 合肥 230031
摘要：目的 探讨清肾颗粒对叶酸诱导的肾纤维化小鼠模型及转化生长因子-β1(TGF-β1)诱导的HK-2细胞的作用及其调控糖酵解重编程、乳酸累积和组蛋白 H3K18 乳酸化的机制.方法 构建叶酸诱导的肾纤维化小鼠模型,分为正常组、模型组和清肾颗粒组(4.0 g·kg-1·d-1),6只/组,灌胃4周.HE 和 Masson 染色观察肾组织病理;Western blotting检测肾组织纤维化标志(α-SMA、FN、E-cad)、糖酵解关键蛋白(HIF-1α、HK2、PFKM、PKM2、LDHA)及组蛋白乳酸化相关蛋白(Pan Kla、H3/H4 乳酸化位点)表达;免疫荧光检测 α-SMA、FN、E-cad、LDHA、H3K18la表达;ELISA检测血清肌酐(SCR)、尿素氮(BUN);比色法检测肾组织乳酸含量.细胞实验:构建TGF-β1刺激下的HK-2细胞模型,SD大鼠灌胃制备清肾颗粒含药血清用于细胞实验,分为正常组、模型组和清肾颗粒含药血清组.CCK-8测细胞活力,EdU染色检测增殖;Western blotting检测细胞内 α-SMA、E-cad、LDHA、H3K18la表达;Seahorse XFe96 检测细胞外氧耗率(OCR)和细胞外酸化率(ECAR);比色法检测细胞内乳酸含量.结果 肾脏病理检查提示,与模型组相比,清肾颗粒可以明显减轻小鼠肾组织纤维化(P<0.05).与模型组相比,清肾颗粒组小鼠肾组织中α-SMA、FN、HIF-1α、HK2、PFKM、PKM2、LDHA、Pan Kla、H3K18la 表达均显著减少,E-cad 表达显著增加(P<0.05).与模型组相比,清肾颗粒组肾组织内 α-SMA、FN、LDHA 表达显著减少,E-cad 表达显著增加(P<0.05),且LDHA与H3K18la在肾小管的共定位水平降低.此外,与模型组相比,清肾颗粒组小鼠血清 Scr、BUN 水平及肾组织内乳酸含量均显著降低(P<0.05).细胞实验中,与模型组相比,清肾颗粒含药血清提高细胞活力、促进细胞增殖(P<0.05).与模型组相比,清肾颗粒含药血清组细胞内α-SMA、LDHA、H3K18la 表达减少(P<0.05);同时显著提高细胞外OCR、降低ECAR,减少细胞内乳酸含量(P<0.05).外源性补充乳酸后,与清肾颗粒含药血清组相比,细胞内LDHA、H3K18la及α-SMA的抑制作用被显著逆转(P<0.05).结论 清肾颗粒通过调控糖酵解重编程、减少乳酸堆积及抑制组蛋白H3K18乳酸化,发挥减轻肾纤维化的作用.
关键词：清肾颗粒糖酵解重编程组蛋白乳酸化肾纤维化
论文发表日期：2026-03-20
在线出版日期：2026-04-01（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：10( 582-591 )
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