枇杷果实中NAD-MDH基因克隆及植物表达载体构建
寇燕
杨俊
高欢欢
陈旭
郭傲
郑国华
1.福建农林大学园艺学院/福建农林大学园艺产品贮运保鲜研究所,福建 福州 3500022.福建农林大学园艺学院/福建农林大学园艺产品贮运保鲜研究所,福建 福州 3500023.福建农林大学园艺学院/福建农林大学园艺产品贮运保鲜研究所,福建 福州 3500024.福建农林大学园艺学院/福建农林大学园艺产品贮运保鲜研究所,福建 福州 3500025.福建农林大学园艺学院/福建农林大学园艺产品贮运保鲜研究所,福建 福州 3500026.福建农林大学园艺学院/福建农林大学园艺产品贮运保鲜研究所,福建 福州 350002
摘要:为探索枇杷果实中苹果酸的积累与降解机制,从枇杷果实转录组中得到NAD-MDH的开放阅读框的基因序列.以枇杷高酸品种解放钟和低酸品种白梨为材料,提取果实中总RN A,运用RT-PCR技术克隆出枇杷果实中苹果酸合成酶基因NAD-MDH,并进行荧光定量PCR分析.结果表明:枇杷果实中苹果酸合成酶基因NAD-MDH的开放阅读框(ORF)为996 bp,共编码了332个氨基酸.经荧光定量PCR分析,解放钟和白梨在花期后95 d时NAD-MDH基因表达量最高;花后80~105 d,NAD-MDH基因在高酸与低酸品种间存在显著差异.采用无缝克隆技术成功构建了植物表达载体EjNAD-MDH-PBI121,并导入根瘤农杆菌EHA105中得到植物转化工程菌,为后期利用转基因技术改良枇杷果实品质及遗传改良打下基础.
关键词:枇杷NAD-MDH基因基因克隆表达分析载体构建
分类号:S667.3(果树园艺)
资助基金:福建农林大学科技创新专项基金项目(KFA17115A)
论文发表日期:2020-04-28
在线出版日期:2025-08-15(本平台首次上网日期,不代表文献的发表时间)
页数:8( 1-8 )
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福建农业科技

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ISSN:0253-2301
年,卷(期):2020,(4)
所属栏目:生物技术