大肠杆菌DH5a菌株高效电击转化条件的优化
吕新
刘兰英
李玥仁
福建省农业科学院农业质量标准与检测技术研究所,福建 福州 350003;福建省农产品质量安全重点实验室,福建 福州 350003
摘要：为探索大肠杆菌DH5a高效电击转化条件,通过对电击转化条件中细胞生长状态、DNA加入量、感受态细胞体积、电场强度、速冻和恢复时间等关键因素进行优化,筛选出大肠杆菌DH5a高效电击转化条件.结果表明:大肠杆菌在细胞生长状态OD600值为0.6时制备感受态细胞,按每管50 μL体积分装、-80℃乙醇速冻后,加入10 pg pUC 19质粒DNA,在20 kv·cm-1电场强度、电容25 μF、电阻200 Ω条件下电击转化,转化后恢复培养60 min,转化效率达1010 cfu·μg-1 DNA以上水平,可满足基因文库构建、抗体库筛选等试验需求.
关键词：大肠杆菌DH5a菌株高效电击转化
分类号：Q939.9(应用微生物学)
资助基金：福建省科技计划公益类项目(2021R1022007)福建省财政专项——福建省农业科学院科技创新团队建设项目(CXTD2021011-3)福建省人民政府、中国农业科学院协同创新工程(XTCXGC2021020)
论文发表日期：2023-02-28
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：5( 8-12 )
英文信息