光滑念珠菌磷酸吡哆醇氧化酶的定向进化改造
王美玲1
陈宇娴2
郑晓音1
卢蓓丝1
杨欣伟1
1.工业微生物发酵技术国家地方联合工程研究中心/福建师范大学生命科学学院,福建 福州 3501082.晋江市实验中学,福建 泉州 362200
摘要：磷酸吡哆醇氧化酶(pyridoxine 5'-phosphate oxidase,PdxH)是磷酸吡哆醛(Pyridoxal-5'-phosphate,PLP)生物合成途径的限速酶,是影响PLP高效合成的关键.以来源于光滑念珠菌Nakaseomyces bracarensis中的PdxH(NbPdxH)为研究对象,通过定向进化和高通量筛选对NbPdxH进行改造,以提高酶的催化活性.结果表明:通过筛选成功获得 1 株催化效率提高的突变株pRB1s-NbpdxHM8/BW25113,使得PLP产量达到 5.3 g·L-1,PNP转化率为 71%,与原始菌株相比提高了 27%.通过结构分析,推测NbPdxHM8 活性位点附近的电荷发生改变,进而提高酶与底物的结合效率.研究结果为PLP的高效合成提供了新的思路.
关键词：磷酸吡哆醛磷酸吡哆醇氧化酶定向进化高通量筛选
分类号：R446.5(诊断学)
资助基金：福建省自然科学基金面上项目(2021J01170)
论文发表日期：2024-12-28
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：6( 1-6 )
英文信息