大鼠骨髓间充质干细胞分离与培养方法的优化研究
祝旭龙1
颜谭1
王永恒2
程冲2
姚维杰2
吕毅3
李建辉2
1.西安交通大学第三附属医院(陕西省人民医院)肿瘤外科,陕西西安710068;延安大学,医学院,陕西延安7160002.西安交通大学第三附属医院(陕西省人民医院)肿瘤外科,陕西西安,7100683.西安交通大学第一附属医院肝胆外科,陕西西安,710061
摘要：目的 探讨一个相对直接、简洁的方法分离、培养、纯化大鼠的骨髓间充质干细胞.方法 使用贴壁法分离大鼠的骨髓间充质干细胞,通过培养初期的频繁换液和传代过程中减少胰蛋白酶的暴露时间,达到骨髓间充质干细胞的纯化.使用流式细胞仪检测细胞表面标志物,MTT法检测细胞生长状况,暴露于不同的诱导培养基使细胞成骨、成脂,并向肝胆系分化.结果 分离所得的细胞阳性表达CD29, CD44,CD90,而对于造血细胞标志物CD45呈阴性.在成骨、成脂培养基的诱导下,细胞ALP、茜素红、油红O染色均呈阳性,并发现传至10代的细胞仍保持分化功能.我们将骨髓间充质干细胞贯续暴露于不同的细胞因子和激素,得到了表达肝细胞、胆管上皮细胞特异标志的子代细胞.结论 通过改良后的方法可以高效、简洁地分离出形态均一地大鼠骨髓间充质干细胞,并能够向多胚层的细胞分化.
关键词：大鼠骨髓间充质干细胞分离肝细胞胆管上皮细胞
资助基金：国家自然科学基金(81170455)陕西省科技统筹创新工程计划(81170455)
论文发表日期：2014-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：6( 1-6 )
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