CA125抗原核酸适体的筛选及鉴定
黄百海1
何雷1
李保林2
修尘林1
赵运旺2
1.燕山大学环境与化学工程学院,河北 秦皇岛 0660042.秦皇岛市第一医院,河北 秦皇岛 066000
摘要：目的 建立一种基于核酸适体快速检测肿瘤血清标志物CA125抗原的方法.方法 以CA125抗原为筛选靶标,CA199抗原为反筛选靶标,羧基化琼脂磁珠为筛选介质,利用指数级富集配体的系统进化技术筛选其高特异性核酸适体,利用生物信息学方法对核酸适体进行序列分析和二级结构预测,荧光定量法分析核酸适体的亲和力,ELONA法测定核酸适体的特异性.结果 经过6轮消减SELEX筛选,次级ssDNA文库的亲和力逐渐提高,特异性次级ssDNA文库逐轮富集,经二代测序,获得3条拷贝数>1000的核酸序列(Apt-1、Apt-2、Apt-3),可特异性识别CA125抗原,测定Kd值,分别为41.02±4.9、19.06±9.0、10.02±5.0 nmol/L,Apt-3亲和力最高.结论 功能性核酸适体Apt-3能高特异性识别CA125抗原,为肿瘤血清标志物CA125检测提供了一种新的、快速、有效的工具和手段.
关键词：CA125抗原消减SELEX技术核酸适体高通量测序技术
资助基金：国家自然科学基金(30960104)国家自然科学基金(30770639)
论文发表日期：2019-03-30
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：5( 52-56 )
英文信息