鸡B淋巴细胞激活因子(ChBAFF)基因的克隆表达
王步高1
曾德年2
覃宗华3
余劲术3
吴彩艳3
吕敏娜3
蔡建平3
1.湖南农业大学动物医学院,湖南,长沙,410128;广东省农业科学院兽医研究所广东省兽医卫生公共实验室,广东,广州,5106402.湖南农业大学动物医学院,湖南,长沙,4101283.广东省农业科学院兽医研究所广东省兽医卫生公共实验室,广东,广州,510640
摘要:根据GenBank中收录的鸡B淋巴细胞激活因子(chicken B cell activator factor,ChBAFF)基因序列,设计特异引物,以3周龄鸡法氏囊总PNA为模板,经RT-PCR扩增出ChBAFF的ORF序列,测序后,插入质粒pMAL-c2X,构建重组表达载体,转染到大肠杆菌Rosset(DE3),并以IPTG诱导表达,SDS-PAGE分析表明,重组蛋白的表达量约占菌体总蛋白的25%,融合蛋白的分子量约为75 ku,所表达重组蛋白主要存在于菌体裂解物上清液中,为可溶性表达.以淀粉树脂柱亲和层析纯化重组蛋白后进行SDS-PAGE,用BandScan软件分析,提纯重组蛋白的含量可达97.5%.MTT比色法分析证明,纯化的重组蛋白可显著刺激鸡脾脏淋巴细胞的活化.
关键词:B淋巴细胞激活因子(BAFF)基因克隆表达
分类号:S814.8(普通畜牧学)
论文发表日期:2007-01-01
在线出版日期:2025-08-15(本平台首次上网日期,不代表文献的发表时间)
页数:4( 29-32 )
英文信息展开
广东畜牧兽医科技

广东畜牧兽医科技

ISSN:1005-8567
年,卷(期):2007,32(3)
所属栏目:试验研究