鸡降钙素基因克隆及其在COS-1细胞中的表达
俞路
王雅倩
章世元
李治学
卜祥斌
1.扬州大学动物科学与技术学院,江苏,扬州,2250092.扬州大学动物科学与技术学院,江苏,扬州,2250093.扬州大学动物科学与技术学院,江苏,扬州,2250094.扬州大学动物科学与技术学院,江苏,扬州,2250095.扬州大学动物科学与技术学院,江苏,扬州,225009
摘要：采集新扬州产蛋鸡的腮后腺组织直接提取总RNA进行反转录聚合酶链式反应(RT-PCR),扩增产物进行克隆、测序,获得新扬州鸡降钙素(CT)基因序列.测序表明,CT基因核苷酸长度为417bp,编码139个氨基酸.与GenBank上发表序列相比较,核苷酸相似性为99.8%,在第135位处存在G-C的有益突变.与从GenBank下载读取的红点鲑、大马哈鱼、河豚、斑马鱼、人、家鼠、绵羊、犬8个物种序列进行比较分析,核苷酸相似性分别为:74.0%、63.3%、59.5%、55.6%、52.8%、50.6%、48%和42.2%.将该基因片段克隆进真核表达载体pCEP4,构建重组质粒pCEP4-CT,所获重组质粒经过酶切,测序鉴定,在PEI作用下转染CT细胞,通过间接免疫荧光试验(IFA)检测到了CT在COS-1中的表达.本研究为利用pCEP4-CT调控机体骨钙代谢、防治蛋鸡骨质疏松症奠定了基础.
关键词：鸡降钙素基因克隆表达载体IFA
分类号：S859.79+9.9(动物医学（兽医学）)
论文发表日期：2008-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：5( 39-42,48 )