猪源流感病毒NS1基因的克隆及原核表达
李敏1
向华2
宣华2
蔡建平2
王贵平2
1.军事医学科学院实验动物中心,北京,100071;广东省农业科学院兽医研究所,广东,广州,5106402.广东省农业科学院兽医研究所,广东,广州,510640
摘要：对H3N2亚型猪流感病毒NS1基因进行原核表达,获得纯化表达产物,以期为检测猪流感抗体的ELISA试剂盒的研制奠定基础.采用RT-PCR方法扩增H3N2亚型猪源流感病毒的NS1基因(693 bp),并将该片段克隆至pET-28(a)构建重组表达质粒pET-NS1.将重组质粒转化E.coli BL21(DE3)感受态细胞,以终浓度1 mmol/L的IPTG在不同时间进行诱导表达,SDS-PAGE检测蛋白表达情况,并经Western-blot分析表达产物的抗原性.pET-NS1重组表达质粒表达的NS1蛋白相对分子质量约为26 kD,1 mmol/L的IPTG诱导4 h时蛋白表达量达到高峰.Western-blot印迹分析证实表达蛋白能与阳性血清发生特异性反应,而与阴性血清不反应.NS1基因的原核表达产物可用来鉴别流感感染猪群和灭活疫苗免疫猪群.
关键词：猪流感病毒H3N2NS1原核表达
分类号：A814.8(马克思主义的学习和研究)
论文发表日期：2009-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 31-34 )
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