多重荧光PCR检测水产品致病菌方法的建立与应用研究
许如苏1
林志雄2
林彩华1
陈冠武1
蔡颖1
陈其生1
杨奇志3
1.汕头出入境检验检疫局,广东汕头,51503122.广东出入境检验检疫局,广东广州,5106233.罗氏诊断产品有限公司广州办事处,广东广州,510095
摘要：根据沙门氏菌invA基因、副溶血性弧菌toxR基因和大肠杆菌O157：H7 RFBE基因的保守序列，设计引物和探针，通过优化反应体系，测定其灵敏度和特异性，建立了可同时检测上述三种致病菌的多重实时荧光PCR方法。该方法对纯茵的检测灵敏度均低于1O cfu／PCR反应体系。人工染菌样品经6h增菌，检测的灵敏度可低于10cfu／25g；对48株标准／参考菌株的检测结果，只有目的菌株呈阳性反应；而定量检测批内和批间的变异系数均小于2％。应用本法检测人工染菌样品和进出口水产品样品，结果与sN标准方法检测结果一致。本法可在8h内完成对水产品中上述三种致病菌的定性或定量检测，可适应于进出口水产品的快速检验。
关键词：沙门氏菌副溶血性弧菌大肠杆菌O157：H7多重实时荧光PCR
分类号：S852.69(动物医学（兽医学）)
论文发表日期：2011-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：6( 22-27 )
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