鸭坦布苏病毒和产蛋下降综合征病毒二重PCR检测方法的建立
孙敏华1
李林林1
董嘉文1
袁建丰1
邝瑞欢1
胡奇林2
1.广东省农业科学院动物卫生研究所,广东省畜禽疫病防治研究重点实验室/广东省兽医公共卫生公共实验室,广东广州5106402.广东省农业科学院动物卫生研究所,广东省畜禽疫病防治研究重点实验室/广东省兽医公共卫生公共实验室,广东广州510640;福建农业科学院畜牧兽医研究所,福建福州350013
摘要：参考GenBank上已发表的鸭坦布苏病毒(DTMUV)NS5基因序列和产蛋下降综合征病毒(EDSV)五邻体(penton)基因序列,分别设计了检测DTMUV和EDSV的特异性引物,扩增目的片段大小分别为242 bp和181 bp.通过退火温度及引物浓度的优化,建立了针对这两种病毒的二重PCR检测方法.特异性试验结果表明,该方法可以同时检测DTMUV和EDSV,且不与鸭肝炎病毒、鸭瘟病毒、番鸭呼肠孤病毒、小鹅瘟病毒、番鸭细小病毒、H9亚型禽流感病毒、新城疫病毒以及大肠杆菌的核酸发生交叉反应;敏感性试验表明,该方法对DTMUV 的最低检出限为590个拷贝,对EDSV的最低检出限为3 260个拷贝;该方法重复性良好,对不同批次的样品扩增效果良好.通过检测两种病毒感染的阳性病料各1 0份,结果显示,该二重PCR检测方法对阳性样品的检出率可达100％.这表明该方法可以用于鸭坦布苏病毒和产蛋下降综合征病毒的检测.
关键词：鸭坦布苏病毒产蛋下降综合征病毒二重PCR
分类号：S852.65+9.5(动物医学（兽医学）)
资助基金：公益性行业(农业)科研专项(201003012)广东省科技计划(2012A020100001)广东省科技计划(2012B020306009)广东省科技计划(2012B010300030)广东省农科院院长基金(201436)广东省农科院院长基金(201412)广州市科技计划(2014Y2-00003)
论文发表日期：2015-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：5( 29-33 )
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