检测鸭坦布苏病毒NS1抗体ELISA方法的建立
孙敏华1
郭建伟2
李林林1
董嘉文1
邝瑞欢1
吴玄光3
张建峰1
胡奇林4
张春红1
1.广东省农业科学院动物卫生研究所,广东省畜禽疫病防治研究重点实验室,广东省兽医公共卫生公共实验室,广东广州 5106402.广东省农业科学院动物卫生研究所,广东省畜禽疫病防治研究重点实验室,广东省兽医公共卫生公共实验室,广东广州 510640;华南农业大学兽医学院,广东广州 5106423.华南农业大学兽医学院,广东广州,5106424.福建农业科学院畜牧兽医研究所,福建福州,350013
摘要：为了检测鸭群中鸭坦布苏病毒的血清学流行情况,本研究在前期成功表达鸭坦布苏病毒NS1蛋白的基础上,建立了检测鸭血清中鸭坦布苏病毒抗体的间接ELISA方法.棋盘法确定了当纯化的NS1蛋白包被量为0.188μg/孔,待检血清1∶200稀释,HRP标记的兔抗鸭二抗1∶16000倍稀释时反应条件最佳.在最佳反应条件下,阴阳性临界值判定标准为0.467.用建立的间接ELISA方法对番鸭细小病毒、鹅细小病毒、鸭肝炎病毒、鸭疫里默氏杆菌阳性血清进行了检测,均无交叉反应,表明该方法具有良好的特异性.批内和批间重复试验的最大变异系数分别为6％和1 0％,显示该方法具有很好的稳定性.用建立的ELISA方法检测临床鸭坦布苏病毒感染鸭及攻毒蛋鸭的55份临床血清样品,测得52份为阳性,阳性率为94.5％,对36份阴性鸭群血清样品进行检测,36份为阴性,阴性率为100％.该方法为鸭坦布苏病毒的诊断和流行病学监测奠定了基础.
关键词：鸭坦布苏病毒NS1蛋白ELISA
分类号：S858.32(动物医学（兽医学）)Q349+.55(遗传学分支学科)
资助基金：广东省科技计划(2013B020307001,2013B020315005,2014A040401048,2015B020203003,2015B050501007,2015B070701015)广东省农科院院长基金(201412)
论文发表日期：2017-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 37-40 )
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