山羊地方性鼻内肿瘤病毒TaqMan荧光定量RT-PCR检测方法的建立
黎家明1
郑烁东1
罗世诚1
张浩权1
颜广智2
陈盛楠2
刘明杰2
黄良宗1
1.佛山科学技术学院生命科学与工程学院,广东佛山5280002.广东方道基因生物科技有限公司,广东佛山528000
摘要：为建立山羊地方性鼻内肿瘤病毒(Enzootic nasal tumor virus of goats,ENTV-2)快速检测方法,根据ENTV-2 env基因保守区域设计引物和TaqMan探针,通过优化反应条件,建立TaqMan荧光定量RT-PCR检测方法,并对其特异性、灵敏性、重复性与临床检测效果进行验证.结果显示,该方法建立的标准曲线在重组质粒浓度为1.019×109—1.019×102 copies/μL时,相关系数R2为0.998,Ct值和重组质粒浓度有良好的线性关系;与相关的其他5种羊常见病原无交叉反应,最低检测限度为10.19 copies/μL,组间和组内的变异系数均在1.5％内.利用本研究建立的方法与常规RT-PCR对20份临床样品进行对比检测,两种方法的ENTV-2阳性检出率分别为60％(12/20)和30％(6/20),两种方法的总符合率为70％(14/20).结果表明,本研究建立的方法特异性强、灵敏度高、重复性好,为ENTV-2的诊断和流行病学调查提供技术手段.
关键词：山羊地方性鼻内肿瘤病毒TaqMan荧光定量RT-PCR
分类号：S856.3(动物医学（兽医学）)
资助基金：广东省现代草牧业(羊)产业技术体系(2019KJ127)(2019KJ127)广东省企业科技特派员项目(kh21368)
论文发表日期：2023-02-18
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：6( 24-28,62 )
英文信息