新城疫病毒、禽传染性支气管炎病毒与禽流感病毒三重RT-qPCR鉴别检测方法的建立与应用
连聪1
向国庆2
潘浩华3
罗胜军2
吕殿红2
宋帅2
贾春玲2
牛瑞辉2
郭素茵4
李汝洪4
邹永基4
温肖会2
1.仲恺农业工程学院,广东广州 5102252.广东省农业科学院动物卫生研究所/广东省畜禽疫病防治研究重点实验室/农业农村部兽用药物与诊断技术广东科学观测实验站/岭南现代农业科学与技术广东省实验室肇庆分中心,广东广州 5106403.清远市清城区东城街道动物卫生防疫站,广东清远 5115104.清远市清城区动物卫生防疫中心,广东清远 511599
摘要：新城疫、禽传染性支气管炎与禽流感是可引起禽类呼吸道症状相似的三种急性传染病,且存在混合感染.为建立新城疫病毒、禽传染性支气管炎病毒与禽流感病毒三重RT-qPCR检测方法,该研究对比了GenBank登录的新城疫病毒(NDV)L基因、禽传染性支气管炎病毒(IBV)1a基因和禽流感病毒(AIV)NP基因,经分析选取保守序列设计了三套引物与探针,通过优化检测方法的反应体系,成功建立了可同时检测NDV、IBV和AIV的三重RT-qPCR方法,并对其特异性、敏感性和重复性进行了评估.结果表明,该方法能够特异性检测出NDV、IBV和AIV,有较好的特异性;方法对三种病毒的最低检测限均为3.02×102copies/μL,有较高的敏感性;重复性实验结果显示批内与批间变异系数均不大于1.28%,有良好的重复性.使用本研究建立的方法对102份临床咽拭子进行检测,并与常规RT-PCR进行比较,总符合率为96.6%.本研究建立的三重RT-qPCR检测方法,特异性强,灵敏度高,可用于NDV、IBV、AIV三种病毒的检测.
关键词：新城疫病毒禽传染性支气管炎病毒禽流感病毒荧光RT-PCR
分类号：S852.65(动物医学（兽医学）)
资助基金：科技创新战略专项(202110TD;R2020PY-JC001)广东省动物疫病野外科学观测研究站项目(2021B1212050021)
论文发表日期：2024-06-18
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：6( 48-53 )
英文信息