传染性法氏囊病毒新型变异株荧光定量RT-PCR检测方法的建立
曹雪珍1
周庆丰2
王连想2
严专强2
林丽苗2
李薇2
李群辉2
1.仲恺农业工程学院动物科技学院,广东广州 510640;温氏食品集团股份有限公司/广东省畜禽健康养殖与环境控制企业重点实验室,广东云浮 5274002.温氏食品集团股份有限公司/广东省畜禽健康养殖与环境控制企业重点实验室,广东云浮 527400
摘要：传染性法氏囊病病毒新型变异株(Novel variant Infectious bursal disease virus,nVarIBDV)给我国养禽业防控法氏囊带来更大的挑战.目前缺乏快速、灵敏的针对nVarIBDV的检测方法.为解决这一问题,该试验根据已发表的nVarIBD的VP2基因序列,设计了一对引物和一条特异性Taq Man探针,建立了一种nVarIBD的Taq Man荧光定量RT-PCR检测方法,该方法可通过特异性扩增nVarIBD VP2基因来确定样品是否为IBDV新型变异株.通过构建重组质粒pMD18-T-VP2对引物和探针进行灵敏性和重复性试验,以及特异性检测,最后使用该检测方法对临床样品进行验证.荧光定量RT-PCR结果显示灵敏性可达1.32×101copies/μL,高于常规RT-PCR的100倍.批内和批间重复试验变异系数(CV)均小于0.5%,结果表明该检测方法有良好的重复性与稳定性.该方法与常见禽病毒核酸无交叉反应,说明检测方法具有较好的特异性.综合本研究结果表明,该研究建立的nVarIBD荧光定量RT-PCR检测方法特异性强、灵敏性高、重复性好,可用于临床样品中IBDV新型变异株的监测.
关键词：传染性法氏囊病病毒新型变异株荧光定量RT-PCRTaq Man探针
分类号：S855.3(动物医学（兽医学）)
资助基金：重大动物疫病新型综合防控技术资助(2022SDZG02)
论文发表日期：2024-06-18
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：7( 54-59,82 )
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