抗水禽呼肠孤病毒σC蛋白抗体间接ELISA方法的建立及鹅群血清学调查
陈稼龙1
何莉1
郑炜鸿1
朱婉君2
张济培1
陈济铛1
1.佛山大学动物科技学院,广东佛山 5282252.佛山天牧生物科技有限公司,广东佛山 528225
摘要：为提供水禽呼肠孤病毒病早期诊断的精准快速检测方法,该试验通过BL21(DE3)原核表达系统稳定表达水禽呼肠孤病毒σC蛋白,并将纯化的重组σC蛋白包被ELISA酶标板,经进一步反应条件优化.结果显示,该试验建立的ELISA检测方法最优反应条件是:抗原包被含量为1 µg/孔,待检血清最佳稀释度为1∶50,孵育时间为45 min,酶标二抗最佳稀释度为1∶500,孵育时间为30 min,最佳底物显色时间为20 min,OD450值≥0.3判定为阳性.该方法具有良好的特异性、敏感性和重复性,对水禽呼肠孤病毒基因Ⅰ型和基因Ⅱ型血清具有一定的交叉反应.对105份临床健康鹅群血清样品进行检测,阳性率高达77.33％.该研究提供了一种敏感高效的快速检测水禽呼肠孤病毒中和抗体的方法,为鹅群临床血清大规模检测提供方法,为研发商品化的ELISA检测试剂盒提供基础.
关键词：水禽呼肠孤病毒σC蛋白间接ELISA方法血清学调查
分类号：S852.65+7(动物医学（兽医学）)
资助基金：广东省普通高校科研项目(2020ZDZX1018)佛山天牧生物科技有限公司技术开发项目(KH22275)佛山万牧洲生物科技有限公司技术开发项目(KH23279)
论文发表日期：2024-12-18
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：8( 8-15 )
英文信息