抗CD4单克隆抗体可变区基因克隆及测序
朱志刚1
沈关心2
朱惠芬2
王晓林2
张悦2
龚非力2
毛平1
1.广东省广州市第一人民医院血液内科,5101802.同济医科大学免疫学教研室,430032
摘要:目的获取抗CD4单克隆抗体(McAb)可变区基因,为构建抗CD4嵌合抗体打下基础.方法从分泌抗人CD4 McAb的杂交瘤细胞系中提取总RNA,用家族特异性引物进行逆转录多聚酶链反应(RT-PCR),分别扩增出重链可变区(VH)基因及轻链可变区(VL)基因.将PCR产物克隆至p GEM-T载体,然后转化JM109细菌.并用全自动DNA序列分析仪对VH及VL基因序列进行测定.结果 VH基因为351bp,编码117aa残基;VL基因为333bp,编码111aa残基.根据K abat分类体系,VH隶属小鼠免疫球蛋白(Ig)重链Ⅱ(A)亚组,VL隶属小鼠Ig κ链Ⅲ亚组.结论从推导出的氨基酸序列证实,所获取的VH和VL序列均符合小鼠Ig可变区的氨基酸序列特征.
关键词:单克隆抗体可变区基因克隆序列分析
分类号:R3(基础医学)
资助基金:中国科学院项目(非规范项目)(39370628)
论文发表日期:2000-01-01
在线出版日期:2025-08-15(本平台首次上网日期,不代表文献的发表时间)
页数:3( 636-638 )
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广东医学

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北大核心CSTPCD
ISSN:1001-9448
年,卷(期):2000,21(8)
所属栏目:实验研究