表达人KIAA1173基因的鼻咽癌6-10B细胞模型的建立
张三泉
蒋会勇
韩西群
胡海
张进华
姚开泰
赵彤
1.南方医科大学南方医院病理科,广州,5105152.南方医科大学南方医院病理科,广州,5105153.南方医科大学南方医院病理科,广州,5105154.南方医科大学南方医院病理科,广州,5105155.南方医科大学南方医院病理科,广州,5105156.南方医科大学南方医院病理科,广州,5105157.南方医科大学南方医院病理科,广州,510515
摘要：目的建立表达人KIAA1173基因的鼻咽癌6-10B细胞模型,为探究人KIAA1173基因在鼻咽癌发病机制中的作用奠定实验基础.方法从新鲜肌肉组织中提取总RNA,采取逆转录PCR(RT-PCR)得到人KIAA1173基因cDNA,纯化PCR产物,与真核表达载体pcDNA3.1(+)连接,转化,铺极,筛选阳性克隆,酶切鉴定并进行序列测定.将重组质粒pcDNA3.1(+)-KIAA1173和空载体利用阳离子脂质体介导转入鼻咽癌6-10B细胞,经G418筛选阳性克隆.用RT-PCR、原位杂交及免疫细胞化学方法检测KIAA1173基因在6-10B细胞中的稳定表达情况.以空白质粒转染组作为对照.结果重组质粒pcDNA3.1(+)-KIAA1173经酶切和DNA测序分析显示与GenBank所公布的相应序列相符,插入方向正确,阅读框架完整.转染KIAA1173基因的6-10B细胞阳性克隆在mRNA和蛋白水平证实,转染细胞内有该基因高表达,表明细胞可表达人KIAA1173基因.结论成功获得了人KIAA1173基因全长cDNA的基因克隆,将该基因导入鼻咽癌6-10B细胞后,获得生物学活性稳定的KIAA1173基因高表达的细胞模型.
关键词：KIAA1173基因鼻咽肿瘤转染细胞模型
分类号：R73(肿瘤学)
资助基金：中国科学院项目（非规范项目）(30270739)军队医学科研项目(300000M201)
论文发表日期：2005-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：3( 1629-1631 )
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