人肝癌胰岛素样生长因子Ⅱ基因P2,P4启动子克隆及序列分析
汤绍辉
杨冬华
黄卫
舒建昌
1.暨南大学附属第一医院消化科,广州,5106302.暨南大学附属第一医院消化科,广州,5106303.暨南大学附属第一医院消化科,广州,5106304.暨南大学附属第一医院消化科,广州,510630
摘要：目的克隆人胰岛素样生长因子Ⅱ(IGF-Ⅱ)基因P2,P4启动子并进行序列分析,以明确肝癌组织中IGF-Ⅱ启动子碱基序列有无改变及其与转录调控的关系,为后续研究奠定基础.方法根据GenBank数据库提供的IGF-Ⅱ基因全序列及有关文献,应用巢式PCR扩增L-02人胎肝细胞系(正常对照)及8例肝癌组织的IGF-ⅡP2,P4启动子,并采用TOPO TA Cloning kit将PCR产物克隆入pCR2.1-TOPO T载体.目的DNA片段和阳性重组子分别通过琼脂糖凝胶电泳及直接测序鉴定.结果①L-02细胞及8例肝癌组织P2,P4启动子均扩增成功,长度分别为684 bp及1 246 bp;②8例肝癌组织P2,P4启动子碱基序列与L-02相应的DNA序列完全相同,未见突变、缺失等改变,经与GenBank数据库比较,结果完全一致.结论①成功克隆了IGF-ⅡP2,P4启动子;②本组肝癌组织中IGF-ⅡP2,P4启动子序列稳定,未见突变、缺失等改变,可能与IGF-Ⅱ异常表达的转录调控机制无关.
关键词：肝细胞癌胰岛素样生长因子Ⅱ启动子克隆
分类号：R73(肿瘤学)
资助基金：中国科学院项目（非规范项目）(30070853)广东省博士启动基金(990422)
论文发表日期：2005-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：3( 1635-1637 )
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