HIV-1 B亚型包膜糖蛋白gp41基因真核表达载体的构建与鉴定
李德良
马文丽
师永霞
李凌
郑文岭
1.南方医科大学基因工程研究所,广州,5105152.南方医科大学基因工程研究所,广州,5105153.南方医科大学基因工程研究所,广州,5105154.南方医科大学基因工程研究所,广州,5105155.南方医科大学基因工程研究所,广州,510515
摘要：目的克隆人类免疫缺陷病毒Ⅰ型B亚型包膜糖蛋白gp41基因并构建真核表达载体,进一步为制备自行设计的以λ噬菌体作为载体的HIV核酸疫苗奠定基础.方法以克隆好的HIV-1B亚型U26942全基因质粒DNA作为模板,根据Genbank中gp41基因的核苷酸序列设计引物,并在引物的5'端分别引入KpnⅠ及XhoⅠ酶切位点,特异性的扩增gp41基因.TA克隆后经双酶切、测序等鉴定重组质粒,再经双酶切、连接构建含gp41编码基因的真核表达载体,并进行酶切及测序鉴定分析pcDNA 3.1(+)/gp41.结果重组质粒经KpnⅠ,XhoⅠ双酶切成5.4kb与1.0kb的片断,表明表达载体pcDNA3.1(+)中插入了gp41基因片断,测序结果表明编码框正确.结论成功构建了HIV-1 B亚型包膜糖蛋白gp41基因的真核表达载体pcDNA3.1(+)/gp41.
关键词：人类免疫缺陷病毒pcDNA3.1(+)gp41
分类号：R4(临床医学)
资助基金：中国科学院项目（非规范项目）(39880032)
论文发表日期：2006-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：3( 458-460 )
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