幽门螺杆菌尿素酶B亚单位功能片段构建及免疫原性研究
袁小澎1
邹全明2
吴超2
张卫军2
郭鹰2
1.南方医科大学珠江医院检验科,广州,5102822.第三军医大学生物临床微生物及免疫学教研室,重庆,400038
摘要:目的 构建表达免疫活性的尿素酶功能片段原核表达体系.方法 根据尿素酶B基因序列以及文献报道的尿素酶活性中心区域,primer5.0设计相应的引物,以Hp基因组为模版,PCR扩增拟表达的尿素酶活性片段,经测序证实后将片段亚克隆于原核表达载体pET28中,转入宿主茵BL21后IPTG诱导表达后,Tris-Tricine PAGE电泳及抗Hp特异性抗体western-tbollting鉴定目的蛋白表达.结果 PCR从Hp基因组中扩增出414bp目的片段,经酶切及测序证实构建了功能片段表达阳性重组子,命名为pU414,IPTG诱导后电泳分析可以发现相应分子量附近出现可疑目的蛋白,能够被特异性血清识别.结论 成功建立尿素酶活性功能片段蛋白表达载体,为下一步实验研究奠定基础.
关键词:幽门螺杆菌尿素酶功能片段
分类号:R3(基础医学)
资助基金:国家高技术研究发展计划(863计划)(2003AA2Z3364)
论文发表日期:2007-01-01
在线出版日期:2025-08-15(本平台首次上网日期,不代表文献的发表时间)
页数:3( 521-523 )
