结核杆菌Esat6与hGM-CSF双顺反子表达载体的构建及鉴定
李君武
黄泽棋
姚翠婵
林绍强
周曙光
李晓栋
宋东
黄清华
王珊
1.暨南大学医学院微生物学与免疫学教研室,广州,5106322.暨南大学医学院微生物学与免疫学教研室,广州,5106323.暨南大学医学院微生物学与免疫学教研室,广州,5106324.暨南大学医学院微生物学与免疫学教研室,广州,5106325.暨南大学医学院微生物学与免疫学教研室,广州,5106326.暨南大学医学院微生物学与免疫学教研室,广州,5106327.暨南大学医学院微生物学与免疫学教研室,广州,5106328.暨南大学医学院微生物学与免疫学教研室,广州,5106329.暨南大学医学院微生物学与免疫学教研室,广州,510632
摘要：目的 从质粒pVAE中克隆目的基因Esat6,与hGM-CSF一起构建双顺反子表达载体pIEG,并进行鉴定.方法 以质粒pVAE为模板扩增出Esat6基因,与pIRES的MCS A进行重组,构建pIEsat6重组质粒.然后再以pORF-hGM-CSF为模板扩增出hGM-CSF基因,与pIRES载体的MCS B进行重组,构建pIGM重组质粒,上述两重组质粒经PCR、限制性内切酶图谱及DNA序列测定分析等多种方法进行鉴定后,再通过酶切、连接把hGM-CSF构建于pIEsat6质粒中,形成双顺反子真核表达载体pIEG.结果 通过PCR可克隆得到相应大小的产物,酶切鉴定所切下的两片段大小约为0.29 kb和0.47 kb,与预计相符.测序结果与报道一致.结论 成功构建结核杆菌Esat6基因与hGM-CSF双顺反子真核表达载体,为进一步研究其结核融合DNA疫苗及其转染DC疫苗原型的免疫保护效果奠定了基础.
关键词：结核分支杆菌Esat6hGM-CSF双顺反子DNA疫苗
分类号：R3(基础医学)
资助基金：广东省科学计划引导项目(2004B31201019)
论文发表日期：2007-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：3( 697-699 )