hBSP稳定转染乳腺癌细胞的筛选和鉴定
杜红延1
王捷2
郑霖2
杨静2
刘大志2
1.南方医科大学生物技术学院,广州,5105152.广州军区广州总医院医学实验中心,广州,510010
摘要：目的 筛选和鉴定人骨唾液蛋白(BSP)的荧光蛋白非融合表达载体和膜靶向表达载体稳定转染的乳腺癌细胞,为BSP在乳腺癌骨转移中作用的进一步体内、外研究奠定基础.方法 经过4周400μg/ml G418的抗性筛选结合流式细胞仪荧光分选系统获得稳定转染乳腺癌细胞.采用RT-PCR、ELISA以及Western-blotting等方法检测和鉴定BSP在乳腺癌细胞中基因水平和蛋白水平的表达情况.结果 筛选获得的乳腺癌细胞中BSP得到稳定表达,以β-肌动蛋白为内参,与空白对照相比BSP蛋白在基因水平上灰度比值从0.446分别增加为0.993和0.942;同时ELISA和Western-bolt实验结果证明BSP蛋白分泌表达和细胞内表达的量也均有所提高.结论 稳定高表达BSP的乳腺癌细胞的获得为进一步BSP在乳腺癌骨转移中的作用的体内外试验研究奠定基础.
关键词：骨唾液蛋白稳定转染乳腺癌细胞筛选鉴定
分类号：R73(肿瘤学)
资助基金：广东省自然科学基金(04003534)广东省自然科学基金(06104396)
论文发表日期：2007-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：3( 874-876 )