乙型肝炎病毒对HepG2细胞表达TLR3的影响
李永伟
朱明芬
郭云蔚
陈伟
凌小强
李刚
1.中山大学附属第三医院感染病科,广州,5106302.中山大学附属第三医院感染病科,广州,5106303.中山大学附属第三医院感染病科,广州,5106304.中山大学附属第三医院感染病科,广州,5106305.中山大学附属第三医院感染病科,广州,5106306.中山大学附属第三医院感染病科,广州,510630
摘要：目的 乙肝病毒全基因组体外扩增,构建质粒并测序,酶切后瞬时转染HePG2细胞,观察对HBV抗原分泌,病原识别受体Toll样受体3(TLR3)的表达及细胞增殖的影响.方法 长片段PCR法扩增HBV DNA全长,构建pBlueScript-HBV质粒并转化宿主菌,摇菌后提取质粒经测序,用Sap Ⅰ酶切,获得HBV 3.2 kb基因组,采用脂质体瞬时转染HepG2细胞株,IMX检测HBV所分泌抗原,台盼蓝计数检测细胞增殖活性,直接免疫荧光流式细胞术(FCM)检测表达TLR3的阳性细胞百分率,并与空白对照组对比.结果 HBsAg和HBeAg的分泌随着转染HBV DNA量的增加而升高,除4 μg和6 μg组两组间比较的表面抗原外,差异均有显著性(P＜0.05).TLR3在转染后均有上调,除4 μg与6 μg组间比较外,各组间差异有显著性(P＜0.05).台盼蓝拒染法示细胞存活随转染剂量的升高而减少(P＜0.05),但4 μg和6 μg两组间比较差异无显著意义(P＞0.05).而各转染剂量组HBsAg和e抗原的分泌及细胞的存活数均与TLR3的表达呈显著正相关(P＜0.01).结论 本研究初步表明乙肝病毒可能直接引起HepG2细胞TLR3的上调,而且上调可能启动了细胞的凋亡或坏死机制,成为HBV损伤细胞的非免疫细胞介导机制.
关键词：乙型肝炎病毒Toll样受体3HepG2细胞株
分类号：R5(内科学)
资助基金：教育部跨世纪优秀人才培养计划(NCET-04-0797)广东省肝脏疾病研究重点实验室基金(2005B60148)
论文发表日期：2007-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：3( 1905-1907 )
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