多聚组氨酸标签的Attacin抗菌肽基因克隆及其在CHO细胞中稳定表达
徐建华1
朱家勇2
金小宝2
许琴英3
张秀明1
庄俊华1
马艳2
王艳2
1.广东省中医院检验科,广州,5101202.广东药学院基础医学院,广州,5100063.广东医学院病原生物学教研室,广东湛江,524023
摘要：目的 克隆家蝇幼虫抗菌肽Attacin-His_6融合基因,构建真核表达载体并转染CHO细胞表达,为深入研究其生物学活性创造条件.方法 以pUCm-T/Attacin载体为模板,用含6×His标签序列的下游引物克隆Attacin-His_6融合基因,并将其构建于pcDNA3.1(+)中,pcDNA3.1/Attacin-His_6重组质粒转染CHO细胞,Zeocin G418筛选阳性细胞株,RT-PCR检测重组质粒在CHO细胞的转录情况.结果 成功扩增出Attacin-His_6融合基因,构建了pcDNA3.1/Attacin-His_6重组质粒并转染入CHO细胞中,RT-PCR从阳性克隆的CHO细胞中扩增出预期大小的目的 片段,从转录水平证实CHO-Attacin-His_6重组细胞株表达了Attacin-His_6基因.结论 抗菌肽Attacin基因哺乳动物型工程细胞表达系统的建立,为进一步制备其肽类抗生素奠定了基础.
关键词：抗菌肽真核表达中国仓鼠卵巢细胞Attacin
分类号：R3(基础医学)
资助基金：国家自然科学基金(30671832)广东省科技厅科技项目(2003B31602)广州市科技攻关计划(2005Z3-E0211)
论文发表日期：2007-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 1910-1913 )