抗人半胱氨酸和甘氨酸富集蛋白2单克隆抗体的制备和鉴定
赵玉梅1
徐伟文1
王穗海1
黄湘1
潘华政1
李明1
季朝能2
1.南方医科大学生物技术学院,广州,5105152.复旦大学生命学院遗传所,上海,200433
摘要：目的 制备半胱氨酸和甘氨酸富集蛋白2(Cysteine and glycine-rich protein 2,CRP2)的单克隆抗体,探讨CRP2蛋白的生物学功能.方法 利用重组CBP2蛋白为免疫原,免疫BALB/C小鼠,取免疫小鼠的脾细胞和同系小鼠的骨髓瘤细胞SP2/0进行常规融合,通过间接ELISA筛选和有限稀释克隆化,获得鼠抗CRP2蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株.通过ELISA,Western-blot和免疫共沉淀实验等方法对其特性进行鉴定.结果 成功地建立了2株稳定分泌抗CRF2蛋白的单克隆抗体杂交瘤细胞株,分别命名为F001和F002.两株单克隆抗体与重组抗原有较强的特异性反应.同时,两株单克隆抗体通过Western-Blot实验都能特异性地结合真核细胞内源性的CRP2蛋白,并且,两株抗体都可以应用于免疫共沉淀实验.结论 获得了效价高、特异性好的CRP2蛋白的单克隆抗体,为CRP2的生物学功能研究奠定了基础.
关键词：蛋白质类单克隆抗体杂交瘤免疫沉淀
分类号：R3(基础医学)
资助基金：国家高技术研究发展计划（863计划）(2006AA02A311)
论文发表日期：2008-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：3( 201-203 )
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