重组腺相关病毒介导增强型绿色荧光蛋白基因经角膜基质瓣转染兔角膜基质细胞的实验研究
汤明芳1
陆晓和2
马骊3
温茜3
罗微3
周瑾2
袁伟2
宫玉波2
1.南方医科大学南方医院眼科,广州,5105152.南方医科大学珠江医院眼科,广州,5102823.南方医科大学生物技术学院分子免疫学研究所,广州,510515
摘要：目的 研究重组腺相关病毒(rAAV)介导增强型绿色荧光蛋白(EGFP)基因经角膜基质瓣转染兔角膜基质细胞的有效性和安全性.方法 微型角膜刀制作兔角膜基质瓣;转染组用含rAAV-EGFP转染液浸泡角膜瓣和角膜基质床10 min,对照组用等量BSS液浸泡角膜辩和角膜基质床10min,不同时间点(1,3,7,14,21 d)通过荧光体视镜观察角膜出现EGFP荧光的起始时间及分布情况,收集角膜,其中一半用激光共聚焦显微镜观察、照相,另一半固定后行HE染色.结果 转染组于转粢第3天,体视荧光显微镜下观察到兔眼角膜辩内面及基质床中开始有GFP阳性表达;7 d达到高峰,21 d时仍有微弱表达.第7天在激光共聚焦显微镜下可观察到兔角膜基质中有明显的荧光表达,对照组角膜始终未见荧光表达,转染组和对照组角膜HE染色均未见炎症细胞浸润及新生血管等异常.结论 rAAV-EGFP经兔角膜基质辩转染角膜基质细胞的方法可将基因安全、相对高效地转入角膜基质细胞.为转基因治疗角膜病提供了新的转粢途径.
关键词：角膜基因转染绿色荧光蛋白腺相关病毒基质瓣
资助基金：广东省自然科学基金(0402438)
论文发表日期：2008-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：3( 542-544 )
英文信息