绿脓杆菌外毒素A常用肽编码基因的克隆与鉴定
刘绮明1
冯木林2
陶爱林2
1.广州医学院第二附属医院耳鼻咽喉头颈外科,广州,5102602.广州医学院第二附属医院过敏反应科,广州,510260
摘要：目的 对绿脓杆菌外毒素A(pseudomonas aeruginosa exotoxin A,PEA)的常用肽编码基因进行克隆,为后续的基因改良奠定物质基础.方法 以绿脓杆菌基因组DNA为模板,以PEA编码基因特异区段为引物,克隆绿脓杆菌外毒素A常用肽编码基因,经菌落PCR筛选出阳性克隆后再进行DNA测序分析.结果 PCR产物克隆后,菌落PCR挑选得到了3个有意义的阳性克隆,DNA测序结果与GenBank中登录的序列之间一致性达99%.结论 成功获得3个阳性克隆;选择适当的退火温度,采用Touchdown PCR,能保证顺利扩增出目的 基因及保证扩增的特异性.
关键词：绿脓杆菌外毒素A基因克隆
资助基金：国家自然科学基金(30640033)广东省科技计划(2005B33801002)
论文发表日期：2008-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：3( 1270-1272 )
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