CFSE标记的淋巴细胞增殖实验检测方法的建立
孙尔维1
袁小澎2
罗宇维2
陈忠华3
1.南方医科大学珠江医院移植免疫研究所2.南方医科大学珠江医院移植免疫研究所,广州,5102823.华中科技大学同济医学院附属同济医院器官移植研究所,武汉,430030
摘要：目的 建立基于流式细胞术和活细胞荧光染料CFSE的淋巴细胞增殖、单向混合淋巴细胞实验的免疫学检测方法.方法 分离单个核细胞,将反应细胞经CFSE染色后,分别加入不同的淋巴细胞增殖刺激物或与灭活的异基因淋巴细胞共培养.培养后细胞经流式细胞术检测标记细胞是否增殖,应用CD4-PE抗体检测增殖细胞中CD4阳性T细胞亚群比例,ModFit软件分析增殖动力模型.计算增殖CDI或PI指数.结果 基于CFSE建立的淋巴细胞增殖实验,经不同刺激物或异基因抗原刺激后增殖指数明显升高,使用CD4-PE抗体进行再次标记后可以对增殖实验中CIM阳性淋巴细胞亚群的增殖进行评估.结论 成功建立了基于CFSE标记淋巴细胞的增殖实验检测方法,该方法简单、实用、灵敏度高,可以取代3H或MTT用于不同条件、不同免疫刺激情况下淋巴细胞增值的检测或评估.
关键词：羧基荧光素乙酰乙酸琥珀酰亚胺酯增殖流式细胞术
分类号：R3(基础医学)
资助基金：国家自然科学基金(30571757)广东省自然科学基金(5200513)广州市科技计划(200723-E0051)
论文发表日期：2008-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：3( 1626-1628 )
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