乙型肝炎病毒聚合酶基因重组腺病毒表达系统的构建和初步鉴定
李晖
彭劼
王战会
周彬
余治健
王程
侯金林
1.南方医科大学南方医院感染内科,广州,5105152.南方医科大学南方医院感染内科,广州,5105153.南方医科大学南方医院感染内科,广州,5105154.南方医科大学南方医院感染内科,广州,5105155.南方医科大学南方医院感染内科,广州,5105156.南方医科大学南方医院感染内科,广州,5105157.南方医科大学南方医院感染内科,广州,510515
摘要：目的 构建乙型肝炎痛毒聚合酶基因(RT/RNaseH区段)腺病毒表达系统并初步鉴定其转录表达.方法 采用PCR方法从pUC19-1.24HBV质粒中扩增RT/RNaseH区段,将该片段与pCMV-Tag2B载体连接构建腺病毒穿梭载体,将其在Bj5183细菌中重组,获得的重组质粒转染到Ad293细胞中包装,待细胞裂解后收集合病毒的上清并感染Huh7细胞,48 h后通过RT-PCR鉴定目的 基因转录.结果 成功扩增HBV RT区并插入pC-MV-Tag2B载体,成功获得腺病毒重组质粒并在AD293中包装成病毒颗粒,病毒颗粒感染Huh7细胞后RT-PCR可以在Huh7细胞中检测到HBV RT区段mRNA转录.结论 成功构建乙型肝炎病毒聚合酶基因RT/RNaseH区段的腺病毒表达系统,该系统能在Huh7细胞中转录,但逆转录蛋白的表达仍待进一步检测.
关键词：HBV聚合酶重组腺病毒
资助基金：国家自然科学基金(30500434)
论文发表日期：2009-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：3( 166-168 )
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