His-GILZ原核表达载体的构建及其表达与纯化
王毅飞1
蔡德鸿1
陈宏1
莫永炎2
伊娜3
邢飞跃4
1.南方医科大学珠江医院内分泌科,广州,5102822.南方医科大学病理生理学教研室,广州,5105153.广东省广州市中医院内分泌科,5101304.暨南大学组织移植与免疫中心,广州,510632
摘要：目的 获取糖皮质激素诱导亮氨酸拉链蛋白(GILZ)的His融合蛋白,为下阶段深入研究GILZ的结构、功能及筛取与其相互作用的蛋白打下基础.方法 利用基因工程技术,BarnH I/Xho I酶切真核表达质粒HA-GILZ/PcDNA3获得GILZ cDNA,重组于能表达6个组氨酸残基的原核表达质粒pET-30a中.然后用该亚克隆重组质粒转化大肠杆茵BL21(DE3),用IPTG诱导表达,用Ni2+-NTA柱纯化.结果 亚克隆获得CILZ/pET-30a高效原核表达重组载体,诱导表达的融合蛋白占细菌总蛋白高达40%以上,纯化的蛋白分子量约为24 kD.结论 成功构建His-GILZ融合蛋白原核表达载体,并高效表达、纯化,为进一步研究其结构功能关系和临床应用奠定了基础.
关键词：糖皮质激素诱导亮氨酸拉链蛋白融合蛋白原核蛋白构建纯化
资助基金：国家自然科学基金(30470829)
论文发表日期：2009-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：3( 191-193 )