从噬菌体随机肽库中筛选及鉴定肺癌特异性多肽
邓伟雄1
罗时敏1
蓝代颜2
梁伟灿2
臧林泉3
1.广东省广州市第一人民医院综合外科,5101802.广东省佛山市西樵山人民医院,5282113.广东药学院药科学院药理教研室,广州,510006
摘要:目的 利用Phage display随机肽库筛选出与肺癌NCI-H1299细胞特异性结合的多肽,并通过ELISA和免疫组化鉴定其特异性和亲和力,为寻找肺癌早期诊断和治疗标志物打下基础.方法 以肺癌细胞NCI-H1299为靶细胞,肺二倍体成纤维细胞MRC-5为吸附细胞,在37℃下对噬菌体随机十二肤库进行四轮减性筛选,挑取单克隆、扩增纯化噬菌体、并经ELISA初步鉴定噬菌体克隆亲和力;对阳性克隆提取质粒,浏序后合成多肤,多肽标记荧光素FITC,以其在肺癌组织芯片上鉴定多肽的亲和力及特异性.结果 经ELISA初步鏊定,随机挑选的18个单克隆中,其中3号对NCI-H1299亲和力最高,将其命名为Phage ZL-3.细胞免疫荧光试验进一步证明,荧光素标记的多肽FITC-ZL-3对NCI-H1299具有高亲和力.结论 利用噬菌体随机十二肽成功筛选出与肺癌细胞具有较高亲和力的多肽ZL-3,为肺癌的早期诊断和靶向治疗奠定基础.
关键词:噬菌体肽库多肽肺癌NCI-H1299减性筛选
资助基金:国家自然科学基金(30572177)教育部人文社会科学研究项目(208105)广东药学院中青年骨干教师专项基金(208105)
论文发表日期:2009-01-01
在线出版日期:2025-08-15(本平台首次上网日期,不代表文献的发表时间)
页数:4( 524-527 )
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