腺病毒载体介导肾癌相关抗原G250基因转染DC诱导CTL治疗肾癌的实验研究
齐桓
郑少斌
1.南方医科大学南方医院泌尿外科,广州,5105152.南方医科大学南方医院泌尿外科,广州,510515
摘要：目的 探讨以腺病毒载体介导肾癌相关抗原G250(Ad-G250)基因转染制备树突状细胞(DC)瘤苗,体外诱导自体T淋巴细胞特异性抗肾癌免疫效应.方法 自健康人外周血中提取单核细胞,将贴壁细胞分为3组(Ad-G250基因转染组、C250蛋白致敏组、未致敏组),用重组人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(rGM-CSF)和白细胞介素-4(rhIL-4)诱导活化;在3组Dc细胞中分别加入自体T淋巴细胞,获得3组不同的细胞毒性T淋巴细胞(CTL).RT-PCR检测G250在DC细胞内的转录情况;流式细胞仪检测DC表面标志分子和G250抗原蛋白的表达情况;四甲基偶氮唑盐法(MTT)检测3组CTL对不同靶细胞(肾癌细胞株786-O、肺癌细胞株A549)的杀伤活性.结果 Ad-G250高效转染DC,G250蛋白在DC内成功表达:采用RT-PCR成功在基因转染组DC中扩增出G250产物;Ad-G250转染的DC表面标志CD40、CD80、CD83、CD86、HLA-DR与其他两组相比差异有显著性(P<0.05),Ad-C250组明显高表达,表明Ad-G250基因转染组可上调DC表面标志表达;Ad-G250组诱导的CTL对G250阳性的786-0靶细胞有很好的细胞毒杀伤效应,此杀伤活性优于G250蛋白致敏组及对照组(P<O.05).结论 以腺病毒为栽体介导抗原基因转染DC,并诱导特异的CTL,从技术上是可行的,而且所诱导的CTL杀伤活性好于采用G250蛋白冲击致敏DC所诱导的CTL,有望成为一种肿瘤免疫治疗的理想方法.此研究方法也说明了以G250为靶点的免疫治疗可能是肾透明细胞癌一种理想治疗模式.
关键词：树突状细胞肾肿瘤腺病毒细胞毒性T淋巴细胞
资助基金：广东省医学科学技术研究基金资助项目(A2008417)广东省科技计划项目(20088060600067)
论文发表日期：2009-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 1249-1252 )
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