小鼠白细胞介素6的克隆表达纯化及鉴定
华江舟
王菊芳
王小宁
1.华南理工大学生物科学与工程学院,广州,5100062.华南理工大学生物科学与工程学院,广州,5100063.华南理工大学生物科学与工程学院,广州,510006
摘要：目的 构建小鼠白细胞介素6(mIL-6)工程菌,通过诱导表达和纯化,得到较高纯度的重组mIL-6融合蛋白.方法 提取小鼠脾脏淋巴细胞总RNA,RT-PCR扩增得到mIL-6基因片段,克隆入pReceiyer-B56x表达载体,转化BL21,诱导表达重组蛋白,采用亲和层析纯化.结果 工程茵采用LB培养基,14℃、1mmol/L的IPTG诱导,表达量占菌体蛋白总量的33.3%,部分为可溶表达.超声破碎茵体,离心后取上清液,经过亲和层析一步纯化,目的 蛋白纯度达91.3%.结论 构建了高效表达mIL-6的工程菌,目的 蛋白部分为可溶表达,为进一步研究白细胞介素6在促进凝血、造血等方面的生物学功能以及其与疾病发生发展的相互关系,并基于此基础上的相关药物开发研究奠定了基础.
关键词：白细胞介素6融合蛋白纯化
资助基金：国家高技术研究发展计划（863计划）(2007AA021702)国家自然科学基金(20736008)基础研究项目(2007J1-C0131)
论文发表日期：2009-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：3( 1252-1254 )