骨唾液酸蛋白双抗夹心酶联免疫吸附试验检测方法的初步建立
严芳
王捷
王江涛
1.广州军区广州总医院医学实验科,广州,5100102.广州军区广州总医院医学实验科,广州,5100103.广州军区广州总医院医学实验科,广州,510010
摘要:目的 建立快速检测骨唾液酸蛋白的酶联免疫吸附试验(ELISA)检测方法,为试剂盒的研制奠定基础.方法 用鼠抗人骨唾液酸蛋白(BSP)单克隆抗体包被酶标板,兔抗人BSP检测,辣根过氧化物酶(HRP)标记的羊抗兔二抗与兔抗人BSP相结合,初步建立BSP的双抗夹心ELISA检测方法.结果 自建双抗夹心ELISA法检测骨唾液酸蛋白的灵敏度为1.5 ng/mL,标准曲线的线性范围为2~100 ng/mL,回归方程y=0.254 8 x+0.077 5(r=0.992);批内批间变异系数分别为4.6%~5.4%和5.2%~7.1%,对人血清做50、25和10ng/mL三个加标浓度的回收率实验,回收率47.2%~101%;4℃有效期至少360 d.结论 成功建立双抗夹心ELISA检测BSP的方法.
关键词:骨唾液酸蛋白双抗夹心ELISA单克隆抗体
资助基金:广东省自然科学基金重点项目(06104396)广东省医学科研基金项目(W2007105)
论文发表日期:2009-01-01
在线出版日期:2025-08-15(本平台首次上网日期,不代表文献的发表时间)
页数:3( 1597-1599 )
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