siRNA沉默CTGF表达对高糖诱导人肾小管上皮细胞转分化的影响
汤珣1
蔡德鸿2
曾莉3
章俊1
1.南方医科大学珠江医院,肾内科,广州,5102822.南方医科大学珠江医院,内分泌科,广州,5102823.南方医科大学公共卫生与热带医学学院,广州,510515
摘要：目的 探讨针对结缔组织生长因子(CTGF)基因的siRNA对高糖条件培养下的人肾小管上皮细胞株HK-2细胞向间充质细胞转分化(EMT)的影响.方法 将体外培养的HK-2细胞分为6组:(1)正常对照组,培养基含D-葡萄糖1g/L;(2)等渗对照组,培养基含D-葡萄糖1g/L,甘露醇3.5 g/L;(3)高糖组,培养基含D-葡萄糖4.5 g/L;(4) 高糖+空白对照组:细胞转染空白质粒后于高糖培养基中培养;(5) 高糖+阴性对照组:细胞转染含无关序列的重组质粒后于高糖培养基中培养;(6) 高糖+干扰组:细胞转染针对CTGF的 siRNA表达质粒后于高糖培养基中培养.应用RT-PCR检测CTGF mRNA水平,Western blot法检测CTGF、E-钙黏蛋白(E-cadherin)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)蛋白水平.结果 高糖刺激可上调HK-2细胞的CTGF mRNA及蛋白水平,并呈时间依赖性降低HK-2细胞的E-cadherin蛋白表达水平,升高α-SMA蛋白表达水平.而通过特异性siRNA抑制CTGF mRNA表达后,细胞的CTGF蛋白表达随时间延长进行性降低,同时伴有细胞E-cadherin蛋白表达升高,α-SMA蛋白表达水平降低.结论 CTGF是高糖诱导HK-2细胞EMT的重要介质.针对CTGF的siRNA能明显改善高糖诱导的肾小管上皮细胞EMT,为进一步寻找DN防治的靶点提供了新的实验依据.
关键词：结缔组织生长因子小分子干扰RNA糖尿病肾病肾小管上皮细胞转分化
资助基金：广东省自然科学基金(200332842)广东省科技计划(2007B031503001,2009B030801221)
论文发表日期：2010-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 55-58 )