人骨形成蛋白2和人骨形成蛋白7成熟肽编码区基因克隆和真核表达载体的构建
吉建新1
廖伟娇2
刘利东2
卢春生2
朱伯平3
范婷婷2
1.广州医学院第一附属医院,口腔科,广州,5101202.广州医学院第一附属医院,检验科,广州,5101203.广州医学院第一附属医院,输血科,广州,510120
摘要：目的 克隆和构建人骨形成蛋白2(BMP-2)和人骨形成蛋白7(BMP-7)成熟肽真核表达载体.方法 采用Trizol法从人骨肉瘤细胞中提取制备总RNA,利用RT-PCR、PCR转录、扩增BMP-2和BMP-7获得成熟肽基因,与真核表达载体pcDNA3.1(+)连接,构建真核表达重组子pcDNA3.1(+)/BMP-2MP和pcDNA3.1(+)/BMP-7MP.结果 总RNA提取液电泳可见在28 S、18 S和5 S处出现明显的条带,PCR和酶切可在439 bp和364 bp出现条带,阳性克隆测序结果与Genebank中登录的序列一致.结论 成功克隆出人BMP-2MP和BMP-7MP基因,成熟肽基因已与pcDNA3.1(+)连接,成功构建其真核表达重组子pcDNA3.1/BMP-2MP和pcDNA3.1/BMP-7MP,为进一步研究BMP-2、BMP-7的功能及其成熟肽基因在骨髓间充质细胞(hMSCs)中表达以及在骨组织工程中的应用研究奠定了基础.
关键词：骨形成蛋白-2骨形成蛋白-7基因克隆真核表达载体
资助基金：广东省社会发展领域科技计划(2007B060401069)广州市教育局项目(2007Z3-E0191;61105)
论文发表日期：2010-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 410-413 )
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