应用正交设计筛选hTERT基因siRNA最佳作用位点
吴斌华1
李祥勇2
周克元2
1.广东医学院检验学院,广东湛江,5240232.广东医学院生物化学和分子生物学研究所,广东湛江,524023
摘要：目的 筛选针对人端粒酶逆转录酶(hTERT)基因的最佳siRNA作用位点和作用浓度.方法 分别选取hTERT基因上3个不同位点的序列,设计为shRNA表达质粒.然后采用SPSS 11.5统计软件设计正交实验,质粒种类、质粒浓度和时间为影响因素,它们的水平均是3个.用脂质体法将质粒转染入鼻咽癌细胞系CNE-2Z内,以MTT法检测细胞生长抑制率.同时以RT-PCR实验验证结果.结果 作用于hTERT亚基2474～2489位点的质粒pmU6- hTERT-3在浓度为0.2 μg/μL作用24 h的siRNA抑制作用效果最好.结论 以正交实验统计原理来筛选siRNA最佳作用位点操作简单方便.
关键词：siRNA正交实验人端粒酶逆转录酶MTT
资助基金：国家自然科学基金(30672741)
论文发表日期：2011-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 1527-1530 )
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