同型半胱氨酸转甲基酶的制备及纯化
杨一芬
王天菊
卿之驹
1.中南大学湘雅二医院检验科,长沙,4100112.中南大学湘雅二医院检验科,长沙,4100113.中南大学湘雅二医院检验科,长沙,410011
摘要：目的 建立同型半胱氨酸转甲基酶(BHMT)的制备及纯化方法,为临床应用提供基础.方法 采用大肠埃希菌表达体系获得BHMT蛋白,然后应用Sephadex CL-6B、DEAE Sepharose Fast Flow、Sephadex G-75层析柱纯化BHMT,并行 Western blot验证.分别用商品化同型半胱氨酸试剂盒和提纯的BHMT测定20份血清的同型半胱氨酸浓度,初步判断纯化的BHMT活性.结果 (1)BHMT在大肠埃希菌体系中成功表达,并经Sephadex CL-6B、DEAE Sepharose Fast Flow、Sephadex G-75层析柱纯化后在Western blot上显示为单一条带,分子量为45 kD.(2)采用纯化的BHMT检测20例标本,与商品化试剂盒检测结果差异无统计学意义[(17.19±4.10)μmol/L vs (16.48±3.48)μmol/L,P＞0.05],且结果呈高度正相关(r=0.92,P<0.05).结论 建立的BHMT的制备及纯化方法切实可行,有望应用于同型半胱氨酸浓度的检测.
关键词：同型半胱氨酸转甲基酶同型半胱氨酸层析法
论文发表日期：2011-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：3( 2505-2507 )