刚地弓形虫His-TgPP2C融合蛋白的表达与纯化
朱森
高学娟
刘小会
陈妙娟
刘丽杰
刘朗夏
1.暨南大学生命与健康工程研究院,广州,5106322.暨南大学生命与健康工程研究院,广州,5106323.暨南大学生命与健康工程研究院,广州,5106324.暨南大学生命与健康工程研究院,广州,5106325.暨南大学生命与健康工程研究院,广州,5106326.暨南大学生命与健康工程研究院,广州,510632
摘要：目的 构建His-TgPP2C重组质粒,在大肠杆菌E.coil BL21(DE3)中进行融合蛋白的表达、纯化及鉴定.方法 利用PCR扩增及基因重组技术,以pcDNA3-TgPP2C为模板,扩增出全长的TgPP2C基因,将所得的PCR产物插入带有His标签的原核表达载体pBAD-His中,得到重组质粒.经XhoⅠ、HindⅢ双酶切及测序鉴定正确后,转化至大肠杆菌E.coli BL21,通过异丙基-β-硫代半乳糖苷诱导表达His-TgPP2C融合蛋白,最后经Ni-NTA柱亲和层析纯化融合蛋白以及Western blot方法鉴定纯化的融合蛋白.结果 得到构建好的His-PP2C质粒及纯化的目的 融合蛋白His-TgPP2C.结论 成功构建pBAD-His-TgPP2C原核表达载体,表达及纯化了His-PP2C融合蛋白,为深入研究TgPP2C蛋白在刚地弓形虫疾病发生发展过程中的作用奠定基础.
关键词：His-PP2C融合蛋白表达纯化刚地弓形虫
资助基金：广东省自然科学基金资助项目(9151065004000005)中央高校基本科研业务费专项资金资助项目(21609705)中央高校基本科研业务费专项资金资助项目(21609317)
论文发表日期：2012-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：3( 177-179 )