神经生长因子对PC12细胞内源性FoxO3a亚细胞分布的影响及其作用机制
段小鹿1
汪海涛1
廖素芬1
黄健初2
张浪1
谭小燕1
郑文华1
1.中山大学药学院郑文华PI组,广州,5100062.广东省东莞市计划生育服务中心,523079
摘要：目的 研究神经生长因子(nerve growth factor,NGF)对内源性FoxO3a转录因子亚细胞定位的影响及其作用机制.方法 PC12细胞分为血清剥夺组、K252a处理组、NGF处理组及K252a+NGF处理组,通过免疫细胞化学(immunocytochemistry)研究给予NGF及K252a处理后,FoxO3a的亚细胞定位情况.应用表达FoxO3a-GFP融合蛋白的质粒,转染PC12细胞,经NGF及K252a处理,观察FoxO3a-GFP的亚细胞定位.通过蛋白免疫印迹(Western blot)研究NGF及K252a处理对TrkA磷酸化水平的影响;应用PI3K、Akt及ERK信号通路抑制剂研究NGF及K252a对TrkA下游Akt、ERK及FoxO3a信号蛋白磷酸化的影响.结果 PC12细胞剥夺血清及剥夺血清加K252a后,内源性FoxO3a主要分布于细胞核内;给予NGF处理后,内源性FoxO3a则外排至细胞核外;NGF+K252a处理后,K252a则可以阻断NGF的作用,FoxO3a位于细胞核内;过表达外源性GFP-FoxO3a质粒的结果 与此一致,Western blot结果 显示给予NGF处理后,NGF受体TrkA及TrkA下游Akt、ERK及FoxO3a的磷酸化水平显著上升,K252a则阻断了这一作用.同时,PI3K的抑制剂LY294002及Akt的抑制剂Akt inhibitor Ⅷ也阻断了NGF诱导的FoxO3a的磷酸化,但MAPK信号通路的抑制剂PD98059则没有这一作用.结论 NGF可促进内源性FoxO3a磷酸化并转位出核,NGF的作用与激活TrkA受体及其下游激酶有关.
关键词：FoxO3a磷酸化核转位神经生长因子
资助基金：国家自然科学基金(30670652、30711120565、30970935)广东省科技计划(2009B060700008)国家外专局外国文教专家重点项目(36000-1181102)广东省外国专家局资助项目(36000-5220001)
论文发表日期：2012-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 575-578 )
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