人脐静脉内皮细胞的原代培养及鉴定
孙慧琳1
湛奕2
刘珍珍3
李筠3
蔡德鸿2
1.广东药学院附属第一医院内分泌科,广州,5100802.南方医科大学珠江医院内分泌科,广州,5102823.广东药学院附属第一医院,广州,510080
摘要：目的 建立一种能大量分离人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)体外培养模型,并对其进行鉴定,为体外血管内皮细胞及相关疾病的研究搭建桥梁.方法 采用0.1%Ⅰ型胶原酶分离脐静脉内皮细胞,于M199培养基(含20%胎牛血清,80%M199不完全培养基,1%终浓度为50 μg/mL内皮细胞生长复合物,1%终浓度为100 μg/mL肝素钠,1%青-链霉素,1%L-谷氨酰胺)中培养,待细胞80%以上融合后,用0.25%的胰酶和0.25%的EDTA消化传代,并在倒置显微镜下观察细胞形态,用免疫荧光法对细胞进行鉴定.结果 原代培养的HUVECs在24 h后完全贴壁,2～3 d可达80%的融合,倒置显微镜下观察细胞呈鹅卵石状排布,免疫荧光显示细胞胞浆中Ⅷ因子相关抗原阳性.结论 0.1%Ⅰ型胶原酶消化HUVECs方法 便于操作,细胞获得量多且生长状态良好.
关键词：人脐静脉内皮细胞细胞原代培养Ⅷ因子相关抗原
资助基金：广东省自然科学基金(S2011010002074)清远市科技计划立项项目(2011B011112044)
论文发表日期：2012-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：3( 744-746 )