犬骨髓基质干细胞源性血管内皮样细胞的诱导分化及细胞特征鉴定
吕玉明1
程立明2
裴国献3
俞庆声4
蔡哲4
郭丽丽4
舒峻4
张可华4
1.广州医学院第三附属医院骨科,广州,5101502.中日友好医院关节外科,北京,1000293.第四军医大学西京医院骨科,西安,7100324.中日友好医院临床医学研究所免疫室,北京,100029
摘要:目的 采用血管内皮细胞生长因子(VEGF)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)定向诱导犬骨髓基质干细胞(bone marrow stromal stem cells,BMSCs),探讨BMSCs向内皮细胞(endothelial cells,ECs)分化的潜能和内皮细胞的特征性鉴定方法.方法 采集犬髂骨骨髓15~20 mL,全骨髓10%FBS DMEM培养液进行原代培养.将第2代纯化的BMSCs细胞悬液接种于含VEGF、bFGF的DMEM/F12培养液(细胞接种密度为1×106·mL-1)体外诱导培养.对细胞形态特征进行观察,对诱导分化的细胞行CD31、vWF、VEGFR-2荧光免疫蛋白检测.结果 原代培养的BMSCs形态呈长梭形或不规则形,呈均匀分布生长.诱导分化后的细胞光镜下单层融合生长,呈铺路石样形态;电镜下细胞呈多边形,可见特征性的Weibel-Palade小体;经成血管内皮细胞诱导培养7~14 d后,BMSCs诱导分化细胞CD31、vWF和VEGFR-2的表达呈阳性.结论 犬BMSCs易于体外分离培养及扩增,经VEGF、bFGF体外定向诱导后的细胞具有血管内皮细胞的特征且细胞纯度高、数量大.
关键词:骨髓基质干细胞血管内皮样细胞血管内皮细胞生长因子成纤维细胞生长因子
资助基金:国家自然科学基金(30772194)
论文发表日期:2012-01-01
在线出版日期:2025-08-15(本平台首次上网日期,不代表文献的发表时间)
页数:4( 746-749 )
