EV71病毒P1和3CD基因共表达重组杆状病毒双顺反子穿梭载体的构建及鉴定
蔡春林1
姚相杰2
赵洁玲1
卓菲1
黎剑华1
1.广东省深圳市罗湖区疾病预防控制中心微生物检验科,5180202.广东省深圳市疾病预防控制中心微生物检验科,518055
摘要：目的 通过克隆EV71病毒结构前体蛋白P1和非结构蛋白3CD,构建共表达P1前体蛋白和非结构蛋白3CD的重组杆状病毒表达载体.方法 设计合成EMCV病毒IRES序列的特异性引物,克隆至含有CMV启动子的杆状病毒穿梭载体pFastBacDual-CMV上,命名为pFBCMV-IRES.从手足口病重症患者分离EV71病毒株,经RT-PCR技术分别扩增出EV71病毒的P1前体蛋白区与3CD区的片段,定向克隆至杆状病毒穿梭载体pFBCMV-IRES的IRES序列的上游和下游,随后转化到大肠杆菌DH5α中,经PCR和双酶切鉴定转化菌落.结果 通过对重组杆状病毒穿梭载体pFBCMV-IRES-P1-3CD进行酶切和DNA序列分析,证明共表达EV71病毒P1和3CD基因的重组杆状病毒双顺反子穿梭载体构建成功.结论 共表达EV71病毒P1和3CD基因重组杆状病毒双顺反子穿梭载体的成功构建,将为下一步制备EV71病毒的类病毒颗粒疫苗打下基础.
关键词：肠道病毒71型杆状病毒类病毒颗粒疫苗
资助基金：广东省医学科研基金(B2010287)广东省深圳市罗湖区软科学研究计划(2010069)
论文发表日期：2012-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：3( 2725-2727 )
英文信息