快速检测人新甲型H1N1、季节性和乙型流感病毒多重PCR方法的建立
孙菲1
李文悌2
欧新华3
王晓春2
1.湖南国际旅行卫生保健中心综合实验室,长沙,4100162.中南大学湘雅医学院医学检验系,长沙,4100133.湖南省长沙市疾病预防控制中心微生物科,410001
摘要:目的 建立一种可以同时检测人类新甲型H1N1、季节性H1N1和H3N2亚型流感病毒及乙型流感病毒的多重PCR方法.方法 根据以上4种流感病毒的特异性基因设计4对引物,建立可同时扩增出4个流感病毒特异性片段的多重PCR的方法.用人的GAPDH基因作为内参判断标本来源和实施质量控制的依据.并进行敏感性、特异性和盲样检测评价实验.结果 该方法可同时扩增出流感病毒亚型的HA基因片段长度分别为106 bp(新甲型H1N1)、135 bp(季节性H1N1)、118 bp(季节性H3N2)、170 bp(乙型流感病毒).该实验检测新甲型H1N1(A/colifornia/07/ 2009)的敏感性为102copies/反应.特异性实验结果显示每对引物只检测对应的病毒,32份盲样检测结果特异性好.结论 该多重PCR方法可同时检测新甲型H1N1及季节性流感病毒,敏感性、特异性强,可用于人类流感病毒的鉴别分型检测.
关键词:人流感新甲型H1N1多重PCR检测
资助基金:湖南省科技计划(2011SK3260)湖南省出入境检验检疫局科技项目(2009hnk001)长沙市科技计划(K0904150-11)
论文发表日期:2012-01-01
在线出版日期:2025-08-15(本平台首次上网日期,不代表文献的发表时间)
页数:3( 2731-2733 )
广东医学

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ISSN:1001-9448
年,卷(期):2012,33(18)
所属栏目:基础研究