骨髓间充质干细胞神经分化中Wnt信号通路的基因芯片分析
曾荣
林治平
郭伟韬
胡资兵
林颢
1.广东医学院附属医院骨科,广东湛江,5240012.广东医学院附属医院骨科,广东湛江,5240013.广东医学院附属医院骨科,广东湛江,5240014.广东医学院附属医院骨科,广东湛江,5240015.广东医学院附属医院骨科,广东湛江,524001
摘要：目的 通过Wnt信号通路PCR基因芯片观察骨髓间充质干细胞(BMSCs)转导Wnt-3a并诱导向神经细胞分化后相关基因的表达变化,寻找Wnt信号通路中调控BMSCs神经分化的靶基因.方法 密度梯度离心加差速贴壁法体外分离和纯化BMSCs,原代培养2周后传代.观察细胞形态特征.基于GatewayTM技术构建双表达慢病毒载体,将Wnt-3a转导至BMSCs.设置转导组、未转导组及对照组,其中转导组和对照组转导Wnt-3a,转导组为扩增后的BMSCs-Wnt-3a,对照组取同时期BMSCs-Wnt-3a,未转导组未转导Wnt-3a.诱导转导组和未转导组细胞神经分化,倒置相差显微镜下观察细胞形态.采用基因芯片技术检测Wnt信号通路基因的改变,用RT-PCR来验证相关基因的上调或者下调.结果 找到2 959个基因上调,4 623个基因下调.在Wnt信号通路的89个基因当中,与神经系统发育和分化相关基因有不同的变化.从中挑选了2个基因做RT-PCR验证,结果表明与芯片结果一致.结论 Wnt通路激活后,下游的基因转录,促进神经分化.
关键词：骨髓间充质干细胞转导神经分化Wnt信号通路基因芯片
资助基金：广东省自然科学基金面上项目(9151027501000017)广东省自然科学基金面上项目(S2011010004096)广东省自然科学基金联合资助项目(S2011020002426)广东医学院附属医院青年科研基金资助项目(20501q010014)
论文发表日期：2012-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：5( 3031-3035 )
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