人Ⅱ型高尔基体膜蛋白73多克隆抗体的制备及免疫学鉴定
吴玉1
蔡媛媛1
徐霞1
林云恩2
1.广州医学院检验系,广州,5101822.广州医学院第一附属医院病理科,广州,510120
摘要：目的 制备人Ⅱ型高尔基体膜蛋白73(Golgi protein 73,GP73)的多克隆抗体,为进一步研究GP73的功能奠定基础.方法 利用重组原核表达载体PET-32a-GP73在大肠杆菌BL21中诱导表达,利用切胶方法 回收纯化蛋白,并免疫新西兰兔制备多克隆抗体.制备的抗体经硫酸铵沉淀纯化后,用ELISA法和Western blot对多克隆抗体进行效价和特异性检测,用免疫组织化学法(IHC)检测纯化抗体在不同肝组织中识别GP73的能力.结果 GP73蛋白表达成功,并成功获得纯化的GP73蛋白及兔抗GP73多克隆抗体;ELISA法测定多克隆抗体效价>16 000;Western blot证明多克隆抗体的特异性良好;IHC显示GP73蛋白在正常肝组织中仅表达于胆管上皮细胞,而在肝癌组织中表达于肝癌细胞和胆管上皮细胞.结论 成功获得了纯化的GP73蛋白及高效价的多克隆抗体,肝脏组织的IHC验证了其良好的特异性.
关键词：高尔基体膜蛋白73肝癌多克隆抗体
论文发表日期：2013-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：3( 181-183 )